知识点一还原糖的检测
1.实验原理
将0.1g/mLNaOH溶液与0.05g/mLCuSO4溶液混合后,立即生成浅蓝色Cu(OH)2悬浊液。。
还原糖在水浴加热的条件下可将Cu(OH)2还原成砖红色的Cu2O沉淀。
还原糖:具有还原性基团的糖类,如葡萄糖、果糖、麦芽糖等。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。
2.实验材料和试剂
材料:梨、葡萄、白萝卜匀浆等。
(选材还原糖含量高,白色或接近白色的组织样液)
试剂:费林试剂(液体:质量浓度为0.1_g/mL的NaOH溶液,乙液:质量浓度为0.05_g/mL的CuSO4溶液)
3.实验步骤
费林试剂的使用方法
A。液体A和B必须致电等量混合均匀再使用。
b.水浴加热(5065)。
C。准备启用。
注:费林试剂之所以需要立即配制并使用,是因为费林试剂不稳定,容易产生Cu(OH)2沉淀。所以应将甲液和乙液分别保存,使用时现配现用。
检测方法步骤
实验结果:蓝色棕色砖红色(沉淀)。
实验结论:组织样本液中含有还原糖。
知识点二蛋白质的检测
1.实验原理
在碱性环境(NaOH)下,蛋白质中的肽键能与缩二脲试剂中的Cu2+反应生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应。
2.实验材料和试剂
(1)材料:豆浆、鲜肝提取物、蛋清稀释液等。
(选择富含蛋白质的食材)
(2)试剂:缩二脲试剂(A液:质量浓度0.1_g/mL的NaOH溶液,B液:质量浓度为0.01_g/mL的CuSO4溶液)
3.实验步骤
缩二脲试剂使用方法:先加A液再加B液,B液不能过量。
检测方法步骤
实验结果:样液变为紫色。
实验结论:蛋清、豆浆、新鲜肝脏均含有蛋白质。
知识点三脂肪的检测
实验原理:苏丹III染料可以将脂肪染成橙色。
2.实验材料和试剂
(1)材质:丰富脂肪的种子,例:花生种子
(2)试剂:质量浓度为0.01_g/mL苏丹染液、体积分数为50%的酒精溶液
3.实验步骤
实验结果:脂肪颗粒染色橘黄色。
实验结论:花生籽中含有脂肪。
知识点四斐林试剂和双缩脲试剂的对比
特别注意:
1、鉴别非还原糖(如蔗糖)时:若与费林试剂混合,在水浴中加热后的现象不是无色,而是浅蓝色(Cu(OH)2的颜色)。
2、如果用蛋清作为蛋白质鉴定材料,必须稀释,以免粘在试管壁上,难以清洗。
3、斐林试剂A液与缩二脲试剂A液完全相同。费林试剂B液用蒸馏水稀释5倍,成为缩二脲试剂B液,可用于蛋白质鉴定。
4、脂肪鉴别过程中,加入1-2滴体积分数为50%的酒精溶液,目的是洗掉浮色,因为苏丹染料易溶于酒精。
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